测序热线:021-33836277 / 33836279合成热线:021-61558487

服务产品

Service Products

测序送样细则

 

样品要求
①菌样
•需注明载体类型和抗性,我们常备Amp, Kan两种抗生素,其他抗性自备;
•应为高拷贝质粒,对于低拷贝质粒,请直接提供约3μg左右纯化质粒;
•需培养的菌液:要求提供的量至少500μl过夜培养的菌液,封口保存,防止交叉污染或渗漏;
•若是特殊抗生素:请提供5ML菌液或质粒用于测序;
•无需培养的菌液:要求提供的量至少为4ml已培养好的菌液;
•大量样品测序:建议在Eppendorf管中用牙签穿刺培养;
•注意:关于噬菌体,我们绝对不收菌液,只收抽提好的质粒,请一定要注意;
②质粒(除特殊样品,我们一般不建议客户提供质粒)
•您自行抽提的质粒务必溶于20μl双蒸水中,电泳检测浓度大于100ng/μl浓度;
•如有可能,同时提供1ml左右含有相应质粒的菌液备用;
•若您要长期测序请您加大质粒的量,大质粒必需注明载体长度,拷贝数低也要注明;
•必须写明载体名称,插入片段长度;
③PCR已纯化
•您自行纯化的PCR产物务必溶于双蒸水,浓度要求至少50ng/μl,量至少20μl以,浓度大于50ng/μl,并注明片段长度,长片段需适当增加量,便于核对样品测序是否有问题,同时方便安排需要测通的样品测序和拼接工作;
•若您要长期测序请您加大PCR纯化产物的量;
•您回收的PCR产物务必为单一条带,否则将无法测序或影响测序结果。
④PCR未纯化
•PCR未纯化产物测序要求片断长度大于100BP小于2KB,如大于2KB最好建议您克隆后测序,浓度要求至少50ng/μl,量至少50μl,并注明片段长度,便于核对样品测序是否有问题,同时方便安排需要测通的样品测序和拼接工作;
•建议您送PCR未纯化产物是电泳可见的单一明亮的特异性条带;
•核对所送样品是否有渗漏现象,如有,建议您重新送样。
自备引物要求
• 引物必须经过PAGE纯化方可测序,浓度要求不低于5pmol/μl(或5μmol/L),体积大于10μl(干粉也可,务必标明OD值);
•请提供引物全序列、PCR退火温度,以供参考(引物长度18-22bp为宜),同时标明引物序列,以便帮助您更好地分析测序结果;
•随机引物、标记引物和简并引物不能用于测序。
样品与引物的保存
您提供的样品及引物没有特殊情况我们保留一个月,超过期限将全部处理。如果您要用超过一个月的样品或引物测序请您重新提供样品和引物。
订单填写细则
①个人信息
您测序订单上登记的个人信息是您提供给我们的最原始资料,所有的测序工作都将依此订单开展,所以务必详细、准确、完整填写。
②样品信息
•确保您样品管上的编号和登记表上样品编号一致,以免使您的样品混淆。同时注意样品编号不要超过8个字节,并不能出现汉字及特殊字符等(仪器不识别);
•确认单个样品反应数及样品反应总数,以免出现多测或漏测现象,造成疑问或不必要的纠纷;
•需要测通或单向测通的可以在表上注明,我们可以直接安排测通,节约您的测序时间。但注意:注明测通的我们将直接安排实验,不再与您确认,所以有任何问题必须提前通知我们;
•菌液和质粒测序一定要写明正确载体名称和引物名称,以便我们正确测序和核对您的测序疑问。
•如果是我处没有的通用引物,请提供合适的引物测序。如您没有引物也可以提供电子版的载体图谱和序列(标明酶切位点和测序方向),我处可帮助设计引物后再安排测序。特别需要注意的是载体名称一定写全,以免用错引物。
如:只写T载体,而PGEM-T和PMD18-T这两种T载体的引物是不能共用。还有PMD18-T、PΜC18(118)、PΜC19(119)等系列载体测序引物不要写正向(+,M13+,M13F)或反向(-,M13-,M13R),要注明M13F(-47)或M13R(-48),因为这类载体较特别。
•菌液测序请注意抗生素(我们备氨苄青霉素,卡那霉素)和培养基类型(我们备LB),如是我处没有的,请您提供5ML新鲜菌液或质粒测序;

 

•有特殊结构的样品(如:拷贝数低、GC rich、有poly结构、发夹结构、重复序列、复杂结构等)一定要在表上注明。这样在安排实验时我们可以有针对的改变实验条件,提高这部分样品的成功率。
 
 

DNA常规测序 DNA合成 全基因合成 试剂耗材