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Shotgun文库构建及测序

 

Shotgun即鸟枪法文库构建是将目标DNA用机械剪切方法随机打断成小片段如1.5-3kb,4-6kb,6-8kb等,把这些DNA片段末端补平后与载体连接,转化相应的宿主菌,形成包含各种目的片段的文库。从构建好的文库中随机挑取克隆测序,之后对测得的数据进行拼接组装及生物信息学常规分析。
常规Shotgun文库:1.5-3kb、4-6kb 、6-8kb,构建对象可包括基因组、病毒、细菌、叶绿体、线粒体、野生质粒,以及Fosmid/BAC克隆等。
实验流程:
DNA提取
剪切成小片段
切胶回收合适大小片段
与载体连接
转化和鉴定文库质量
 

DNA常规测序 DNA合成 全基因合成 试剂耗材